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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC3125 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Plant Dehydrogenase (PDHA) Activity Detection Kit |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價(jià)格：1300
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 植物脫氫酶檢測(cè)試劑盒|PDHA檢測(cè)試劑盒|植物脫氫酶|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹：
生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , PDHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態(tài)，能直接表示生物細(xì)胞對(duì)其基質(zhì)降解能力的強(qiáng)弱。
受氫體2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，即TTC）在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后，其還原產(chǎn)物三苯基甲替（TriphenylFormazone，即TFF）呈現(xiàn)紅色，在波長(zhǎng)485nm處有*吸收峰，采用分光光度法于485nm測(cè)定其吸光值，即得植物脫氫酶活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：粉劑×2瓶。使用前加少量水溶解，定容至50mL，避光、4℃保存（盡量現(xiàn)配現(xiàn)用）。
試劑二：液體100mL×2瓶，4℃保存。
試劑三：乙酸乙酯，自備。
產(chǎn)品說明：
生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , PDHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態(tài)，能直接表示生物細(xì)胞對(duì)其基質(zhì)降解能力的強(qiáng)弱。
受氫體2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，即TTC）在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后，其還原產(chǎn)物三苯基甲替（TriphenylFormazone，即TFF）呈現(xiàn)紅色，在波長(zhǎng)485nm處有*吸收峰，采用分光光度法于485nm測(cè)定其吸光值，即得植物脫氫酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板（非聚苯乙烯/聚丙烯材質(zhì)）、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水、乙酸乙酯（不允許快遞，請(qǐng)用戶自備）。
操作步驟：
一、樣品前處理：
稱取0.1g的植物組織，用雙蒸水清洗3-4次，用濾紙吸干水分，備用。
二、測(cè)定步驟
可見分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至485nm，乙酸乙酯調(diào)零。
操作表：取5mLEP管依次加入
| 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
| 樣品（g） | 0.1 | 0.1 |
| 試劑一（mL） | 1 | |
| 試劑二（mL） | 2 | 1 |
| 充分混勻，37℃，暗培養(yǎng)3h，取出后立即冰浴5min，去濾液，盡量用濾紙吸干樣品，置于研缽/勻漿器中。 | ||
| 試劑三（mL） | 1 | 1 |
| 充分研磨（建議在通風(fēng)櫥操作）后全部移至于離心管中，用少量試劑三沖洗研缽，一起加入離心管，用試劑三定容至2mL，10000rpm/min，4℃，離心5min，取200μL上清至微量玻璃比色皿或96孔板中，測(cè)定485nm下的吸光值。計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。 | ||
三、脫氫酶活性計(jì)算：
A:用微量石英比色皿（光徑，1cm）測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活單位定義：在37℃時(shí)，每小時(shí)每克組織樣品使反應(yīng)體系吸光值每增加0.01為一個(gè)酶活單位。
脫氫酶活性（U/g/h）=ΔA÷0.01÷T÷W=33×ΔA÷W。
B:用96孔板（光徑，0.5cm）測(cè)定的計(jì)算公式如下
酶活單位定義：在37℃時(shí)，每小時(shí)每克組織樣品使反應(yīng)體系吸光值每增加0.005為一個(gè)酶活單位。
脫氫酶活性（U/g/h）=ΔA÷0.005÷T÷W=66.7×ΔA÷W。
T：反應(yīng)時(shí)間，3h；W：樣品鮮重，g。
注意事項(xiàng)：
配制好的試劑一避光保存于4℃，盡量在一周內(nèi)使用，若出現(xiàn)紅色，則不能使用。
試劑三易揮發(fā)，有毒，為了您的健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，戴口罩，戴乳膠手套操作。
反應(yīng)完成后立即冰浴以終止反應(yīng)，并去除干凈殘留的反應(yīng)液。
如果測(cè)定出來的吸光值較大，需把樣品適當(dāng)稀釋再進(jìn)行測(cè)定，注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)。
