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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | P8860 |
| 用途 | 本品易感染細菌，需無菌條件下操作。 |
| 包裝規(guī)格 | 200ml/KIT |
| CAS編號 | |
| 純度 | 現(xiàn)詢客服% |
| 是否進口 | 否 |
保存：18-25℃保存，有效期2年。本品易感染細菌，需無菌條件下操作。無菌條件下操作，啟封后置于常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結晶，影響分離效果。
試劑盒內容：
樣本稀釋液 200mL
清洗液 200mL
*組織淋巴細胞分離液 200mL
淋巴細胞分離方法
1. 制備*的單細胞懸液。
2. 取一支適當?shù)碾x心管，加入與*單細胞懸液等量的分離液（分離液最少不得少于3 mL，總體積不能超過離心管的三分之二，否則會影響分離效果）。
3. 小心吸取單細胞懸液加于分離液液面上，注意保持兩液面界面清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取單細胞懸液，然后小心的平鋪于分離液上，因為兩者的密度差異，將形成明顯的分層界面。）
4.
5. 離心后，此時離心管中由上至下細胞分四層。第一層為稀釋液層；第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層；第三層為透明分離液層；第四層為紅細胞層。
6. 用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細胞至另一潔凈的15mL離心管中，向離心管中加入10ml細胞洗滌液洗滌白膜層細胞，250g，離心10min。
7. 棄上清，5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞，250g，離心10min。
8. 重復步驟7
9. 棄上清，細胞重懸備用。
| 分層示意圖 |
*單細胞懸液的制備方法
*研磨的方法：
1. 無菌條件下摘取*，撕去*被膜，用眼科剪將*剪成小塊。
2. 將尼龍篩網(wǎng)或者是細胞過濾篩放置于平皿上，加入少量全血及組織稀釋液（保證*及獲得的細胞處于液體環(huán)境中）。
3. 將*放置于篩網(wǎng)上，使用注射器活塞或者是無菌鑷子來研磨*（盡量控制研磨力度，保持篩網(wǎng)懸空，避免在皿底上直接研磨而造成大批細胞死亡）
4. 研磨完全后使用全血及組織稀釋液沖洗篩網(wǎng)，收集細胞懸液，再經(jīng)濾網(wǎng)過濾。
注：
A. 可用酶消化法，使用膠原酶對*組織進行消化，得到單細胞懸液。
B. 如果最終得到的細胞需要培養(yǎng)，那全過程所需試劑與器材均要求無菌。
C. 根據(jù)*的體積控制單細胞懸液的濃度在108~109個/mL。
注意事項：
A. 開封前顛倒混勻，本分離液為無菌產(chǎn)品，為延長分離液保存時間，請在無菌條件下啟封，避免微生物污染。
B. 分離液使用時應始終保持室溫（18℃~25℃），如室內溫度較低，可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心，可能會導致白膜層中紅細胞污染加重。
C. 待分離的組織要求新鮮，避免冷凍和冷藏。
D. 部分塑料制品（如聚苯乙烯）因其帶有的靜電作用，可能會導致細胞掛壁，影響分離效果。
如果要進一步對分離的細胞進行培養(yǎng)，那在制備單細胞懸液和分離過程中，注意無菌操作，避免微生物污染。
參考文獻：
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