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土壤中性轉化酶（S-NI）活性檢測試劑盒
微量法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品商標：solarbio
英文名稱：Soil neutral invertase (S-NI) activity assay kit
注意：正式測定前務必取2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。
貨號：BC4045
規(guī)格：100T/48S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：1200
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關鍵詞：土壤中性轉化酶|土壤中性轉化酶活性檢測|S-NI|S-NI活性檢測
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體40mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入10mL 試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；
試劑三：液體10mL×1 瓶，4℃保存。
標準品：粉劑×1 支，4℃保存，10mg 無水葡萄糖。臨用前加入1mL 試劑一溶解,制備10mg/mL葡萄糖標準液備用。

產(chǎn)品簡介：
S-NI 在中性條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代謝關鍵酶之一。
S-NI 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在540nm 有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)540nm 光吸收增加速率與NI 活性成正比。

試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水、50 目篩（或更小）、甲苯。

操作步驟：
一、樣品處理：
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干，過30~50 目篩。
二、測定步驟及加樣表：
1、分光光度計/酶標儀預熱30min，波長調至540nm，蒸餾水調零。
2、標準液的稀釋：將10mg/mL 葡萄糖標準液用試劑一稀釋至0.4、0.3、0.2、0.1、0.08、0.06、0.04mg/mL的葡萄糖標準溶液備用。
3、加樣表：
試劑名稱     測定管     對照管      標準管     空白管
土樣（g）      0.02       0.02         -          -
試劑一（μL）    -         160         -         160
試劑二（μL）    160        -          -          -
標準液（μL）     -         -          160        -
甲苯（μL）       4         4           4         4
混勻，37℃準確水浴1h 后，煮沸10min 左右（蓋緊，以防止水分散失），流水或冰浴冷卻后充分混勻（以保證濃度不變），10000rpm，常溫離心10min，取上清。
上清液（μL）    140       140         140       140
試劑三（μL）    60        60           60        60
混勻，煮沸10min 左右（蓋緊，以防止水分流失），流水冷卻后充分混勻，540nm 處蒸餾水調零，記錄各管吸光值A，記為A 測定管、A 對照管、A 標準管、A 空白管。計算ΔA=A 測定管-A 對照管，ΔA 標準=A 標準管-A 空白管。

S-A I 活性計算：
1、標準曲線的繪制：
以葡萄糖濃度為x 軸，相應的ΔA 標準為y 軸，繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b；將ΔA帶入公式得到x（mg/mL）
2、S-NI 活性計算
單位定義：37℃每g 土壤每天產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
S-NI（U/g）=x×V 酶促÷W÷T=3.936×x÷W。

V 酶促：酶促反應總體積，0.164mL；
W：樣本鮮重，g；
T：反應時間：1/24d。

注意事項：
1、如果加入試劑三，煮沸10min 后有混濁物出現(xiàn)，建議離心除去沉淀（10000rpm，2min），取上清測定吸光度；
2、如果吸光值大于1.3，可以用試劑一將上清液稀釋后測定（計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)）；若吸光值較小，可以增加上清液體積或者土樣鮮重進行測定。