土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性檢測試劑盒 微量法
- 發(fā)布日期: 2019-05-22
- 更新日期: 2025-08-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 |
北京
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品牌 |
Solarbio
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貨號 |
BC4005
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保存條件 |
2-8℃保存
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英文名稱 |
Soil N-acetyl-β-D-glucosidase (S-NAG) activity assay kit
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CAS編號 |
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保質(zhì)期 |
1年
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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性檢測試劑盒說明書
微量法
產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱:Soil N-acetyl-β-D-glucosidase (S-NAG) activity assay kit
產(chǎn)品商標:solarbio
注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號:BC4005
規(guī)格:100T/48S
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存;
參考價格:1440
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞:土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶|S-NAG|S-NAG活性檢測
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2mL丙tong溶解,用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑三:液體30mL×1 瓶,4℃保存;
標準品:液體1mL×1支,5 mmol/L的對硝基ben酚溶液,4℃保存。臨用前用試劑一將標準品稀釋50倍得100μmol/L 的標準溶液。
產(chǎn)品說明:
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)是土壤微生物分泌的溶酶體中的一種酸性水解酶。其活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基ben酚,后者在400nm有*吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。
自備實驗用品及儀器:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、30-50目篩(或更?。┖驼麴s水。
操作步驟:
一、樣本處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過30-50目篩。
二、測定步驟:
(1)分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min,波長調(diào)至400nm,蒸餾水調(diào)零。
(2)加樣表:
試劑名稱 測定管 對照管 標準管 空白管
風(fēng)干土樣(g) 0.03 0.03 - -
試劑一(μL) 165 165 - -
試劑二(μL) 15 - - -
混勻,37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水/冰浴冷卻。
試劑二(μL) - 15 - -
12000g 25℃離心10min,取上清液
上清液(μL) 100 100 - -
標準品(μL) - - 100 -
蒸餾水(μL) - - - 100
試劑三(μL) 200 200 200 200
室溫靜置2min 后,10000g 常溫離心5min,吸取200μL上清于微量玻璃比色皿或直接在96孔板中,測定400nm處的吸光值A(chǔ)。分別記為A測定管、A對照管、A標準管、A空白管。計算ΔA=A 測定管-A對照管,ΔA標準=A標準管-A空白管。每個測定管設(shè)一個對照管。
三、S-NAG 活力計算:
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol 對硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
S-NAG活力(U/g 土樣)=ΔA÷ (ΔA標準÷C標準)×V 反總÷W÷T =0.432× ΔA÷ ΔA標準÷W。
T:反應(yīng)時間,1h=1/24d;
V 反總:反應(yīng)體系總體積:1.8×10-4 L;
C標準:標準溶液濃度,100μmol/L;
W:樣本質(zhì)量。
注意事項:
1、當ΔA 大于1 時,建議將上清液稀釋后進行測定;當ΔA 小于0.02 時,建議延長反應(yīng)時間。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)或注意反應(yīng)時間變化。