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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | solarbio |
貨號 | C0021 |
用途 | |
英文名稱 | Hoechst 33258 Stain solution(1mg/ml) |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 一年 |
是否進口 |
Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258,是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33258的*激發(fā)波長為346nm,*發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,*激發(fā)波長為352nm,*發(fā)射波長為461nm。本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。
使用說明: 使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst 33258染色液稀釋100倍,即為工作液。
1. 對于固定的細胞或組織:
a. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258工作液,覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品3倍體積的工作液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對于活細胞或組織:
a. 加入適當量Hoechst 33258工作液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入1mL工作液,對于96孔板一個孔需加入100μL工作液。
b. 在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。
相關(guān)文獻:
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注意事項:
熒光染料都存在淬滅的問題,為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當天完成檢測,活細胞或組織染色后應立即觀察。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。