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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | solarbio |
| 貨號(hào) | P8230 |
| 用途 | 蛋白質(zhì)合成抑制劑。抑制細(xì)菌、藻類原生物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)。 |
| 包裝規(guī)格 | 25mg |
| CAS編號(hào) | 58-58-2 |
| 純度 | ≥99%% |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
1. 中文名： 嘌呤 霉素
2. 英文名： N- dimethyladenosine dihydrochloride ;Puromycin
3. 別 名： 嘌呤霉素鹽酸鹽
4.CAS 號(hào)： 58-58-2
5. 分子式： C22H29N7O5·2HCl
6. 分子量： 544.43
7. 外 觀： 白色或白中帶有黃色的粉末
8. 特 性： 溶于水，參考濃度50mg/ml。
9. 貨 號(hào)： P8230
10. 品 牌： solarbio
11. 儲(chǔ)存條件： ?20℃
12. 詳細(xì)介紹： 蛋白質(zhì)合成抑制劑。抑制細(xì)菌、藻類?-生物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng) . 嘌呤 霉素(puromycin;PM ) 是一種 蛋白質(zhì)合成抑制劑 ,它具有與 tRNA 分子末端類似的結(jié)構(gòu)，能夠同 氨基酸 結(jié)合，代替 氨?；? 的tRNA同 核糖體 的 A位點(diǎn) 結(jié)合，并摻入到生長(zhǎng)的肽鏈中。雖然嘌呤霉素能夠同A位點(diǎn)結(jié)合，但是不能參與隨后的任何反應(yīng)， 因而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的 多肽 。
作用：抑制蛋白質(zhì)合成的延長(zhǎng)
有效期 4年
溶解性 50 mg/mL in water
別名 二鹽酸嘌呤霉素；嘌呤霉素鹽酸鹽
英文名稱 Puromycin
CAS 58-58-2
分子式 C22H29N7O5·2HCl
分子量 544.44
儲(chǔ)存條件 -20℃
危險(xiǎn)代碼 R:22
純度 PURITY: ≥99%
外觀（性狀） 白色粉末
單位 支
說明：蛋白質(zhì)合成抑制劑。抑制細(xì)菌、藻類原生物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)。
嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger）發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死革蘭氏陽(yáng)性菌，各種動(dòng)物和昆蟲細(xì)胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。作用機(jī)制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的類似物，能夠與核糖體的A位點(diǎn)結(jié)合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素同A位點(diǎn)結(jié)合后，不會(huì)參與隨后的任何反應(yīng)，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
嘌呤霉素產(chǎn)生菌Streptomyces alboniger內(nèi)發(fā)現(xiàn)的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶（PAC），賦予機(jī)體對(duì)嘌呤霉素產(chǎn)生抗性。這一特性如今普遍應(yīng)用于篩選特定攜帶pac基因質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
嘌呤霉素在細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選中的普遍應(yīng)用與慢病毒載體的特性有關(guān)，現(xiàn)在商業(yè)化的慢病毒載體多數(shù)都攜帶pac基因。在某些特定情況下，嘌呤霉素亦可以用來篩選轉(zhuǎn)化攜帶pac基因質(zhì)粒的大腸桿菌菌株。
溶解性：溶于水，參考濃度50mg/ml。
使用方法
1.建議使用濃度
哺乳動(dòng)物細(xì)胞：1-10 μg/mL，*濃度需要?dú)缜€來確定；
大腸桿菌：LB瓊脂培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化pac基因的大腸桿菌，使用濃度為125μg/mL。注：使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩(wěn)轉(zhuǎn)株需要精確的pH值調(diào)節(jié)，而且受宿主細(xì)胞本身的影響。
2.溶解方法
用蒸餾水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，經(jīng)0.22 μm濾膜過濾除菌后分裝于-20℃凍存；也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的儲(chǔ)存液。
3. 嘌呤霉素殺滅曲線的確定（以shRNA轉(zhuǎn)染或者慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)為例）
嘌呤霉素有效篩選濃度跟細(xì)胞類型、生長(zhǎng)狀態(tài)、細(xì)胞密度、細(xì)胞代謝情況及細(xì)胞所處細(xì)胞周期位置等有關(guān)。為了篩選到穩(wěn)定表達(dá)的shRNA細(xì)胞株，確定殺死未轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的*濃度嘌呤霉素至關(guān)重要。建議初次做實(shí)驗(yàn)的客戶一定要建立適合自身實(shí)驗(yàn)體系的殺死曲線（kill curve）。
1） Day 1：24孔板內(nèi)以5~8 x 104 cells/孔的密度鋪板，鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn)。37℃細(xì)胞孵育過夜；
2） Day 2：a）準(zhǔn)備篩選培養(yǎng)基：含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基（如0-15μg/mL，至少5個(gè)梯度）；b）往孵育過夜后的細(xì)胞內(nèi)更換新鮮配制的篩選培養(yǎng)基；之后37℃孵育細(xì)胞；
3） Day 4：更換新鮮的篩選培養(yǎng)基，并觀察細(xì)胞存活率。
4） 根據(jù)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，約2-3天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基；
5） 每日監(jiān)測(cè)細(xì)胞，觀察存活細(xì)胞率，從而確定抗生素篩選開始4-6天內(nèi)有效殺死非轉(zhuǎn)染或者所有非轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的藥物*濃度。
4. 哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的篩選
等轉(zhuǎn)染含有pac基因的質(zhì)粒后，細(xì)胞在含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基中增殖，以篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子。
1）細(xì)胞轉(zhuǎn)染48h后，將細(xì)胞（原樣或稀釋）置于含有適當(dāng)濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
注意：當(dāng)細(xì)胞處于分裂活躍期時(shí)，抗生素作用最明顯。細(xì)胞過于密集，抗生素產(chǎn)生的效力會(huì)明顯下降。*進(jìn)行細(xì)胞分盤使其密度不超過25%。
2）每隔2-3天，移除和更換含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基。
3）篩選7天后評(píng)估細(xì)胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時(shí)間，這依賴于宿主細(xì)胞系和轉(zhuǎn)染篩選效率。注意：每日進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48h，有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。
4）轉(zhuǎn)移和放置5-10個(gè)抗性*到一個(gè)35mm的培養(yǎng)皿中，用選擇培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)7天。此次富集培養(yǎng)是為日后的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)做準(zhǔn)備。
注意事項(xiàng)
1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2）嘌呤霉素為有毒化合物，操作時(shí)請(qǐng)小心拿放。
參考文獻(xiàn)：
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《CRISPR-Cas9 Mediated RNase L Knockout Regulates Cellular Function of PK-15 Cells and Increases PRV Replication》 作者:Chao Sui, Dandan Jiang, Xiangju Wu, Xiaoyan Cong, Feng Li, Yingli Shang, Jinqiu Wang, Sidang Liu, Hu Shan, Jing Qi, and Yijun Du 期刊:BioMed Research International 影響因子:2.197 PMID:30941371
《MicroRNA-206 Reduces Osteosarcoma Cell Malignancy In Vitro by Targeting the PAX3-MET Axis》 作者:Fang-Biao Zhan, Xian-Wei Zhang, Shi-Long Feng, Jun Cheng, You Zhang, Bo Li, Li-Zhong Xie, and Qian-Rong Deng 期刊:Yonsei Medical Journal 影響因子:1.759 PMID:30666838
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《High methylation of the 4-aminobutyrate aminotransferase gene predicts a poor prognosis in patients with myelodysplastic syndrome》 作者:Guangjie Zhao Nianyi Li Shuang Li Wanling Wu Xiaoqin Wang Jingwen Gu 期刊:International Journal of Oncology Pages: 491-504 影響因子:3.333 PMID:30535457
《Knockdown of YAP inhibits growth in Hep-2 laryngeal cancer cells via epithelial-mesenchymal transition and the Wnt/β-catenin pathway》 作者:Xiaomin Tang, Yuxuan Sun, Ganglun Wan, Jiaqiang Sun, Jingwu Sun and Chunchen Pan 期刊:BMC Cancer 影響因子:2.933 PMID:31269911
《Panaxadiol inhibits synaptic dysfunction in Alzheimer's disease and targets the Fyn protein in APP/PS1 mice and APP-SH-SY5Y cells》 作者:Xicai Liang，Yingjia Yao，YingLin Liang，KongHong he，XiaoYue Shi，Jingxian Yang 期刊:Life Sciences 影響因子:3.448 PMID:30735733
《Prognostic implications and oncogenic roles of MYBL2 protein expression in esophageal squamous-cell carcinoma》 作者:Hui Qin,Yunyun Li, Hongyan Zhang,Feng Wang, Hongliu He, Xue Bai,and Shanshan Li 期刊:OncoTargets and Therapy 影響因子:3.046 PMID:30881043
《Establishment of an immortalized intestinal epithelial cell line from tree shrews by lentivirus-mediated hTERT gene transduction》 作者:Bowen Yin，Qingkai Song，Lingxia Chen，Xiaofei Li，Yuanyuan Han，Xuan Wang，Jiejie Dai，Xiaomei Sun 期刊:Cytotechnology 影響因子:1.672 PMID:30603916
公司簡(jiǎn)介
北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年， 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的大型高科技生物企業(yè)。 公司總部位于北京，擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心，公司提供的產(chǎn)品近萬(wàn)種，超過5000種常備現(xiàn)貨，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域，并不斷推陳新出擴(kuò)充種類，為用戶提供優(yōu)秀，專業(yè)的產(chǎn)品。 立足北京，輻射全國(guó)，隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國(guó)生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠(chéng)招各地代理商，歡迎垂詢并期待您的加入！
