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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | solarbio |
| 貨號 | PC1100 |
| 保存條件 | -20℃ |
| 英文名稱 | Taq DNA Polymerase |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年個(gè)月 |
產(chǎn) 品簡介：本制品是 94KD的耐熱的DNA聚合酶。是把Thermusaquaticus DNA Polymerase的基因?-過克隆轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后，分離提取而得到的。它與天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。該酶反應(yīng)需Mg2+參與，它以雙鏈DNA為模板催化核苷酸從5’向3’末端形成雙鏈DNA。該酶同時(shí)具有5’→3’核酸外切酶活性。該產(chǎn)品主要用于DNA的PCR擴(kuò)增，DNA測序，可以很好地?cái)U(kuò)增1kb的DNA片段。該產(chǎn)品主要包括酶、10×反應(yīng)緩沖液與氯化鎂溶液。 |
單位定義：在74℃，30分鐘內(nèi)，能夠吸收10mmol dNTP，形成酸性不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)活性單位。 |
酶儲存緩沖液B:50％甘油，20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5％Tween20和0.5％Nonidet P40。 |
配套試劑： |
1．10×反應(yīng)緩沖液(不含MgCl2): Taq DNA Polymerase 10 X Reaction buffer (without Mg2+)包含 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的適濃度為0.2毫摩爾。 |
2．25mM MgCl2：反應(yīng)中鎂離子在混合物中的終濃度由使用者根據(jù)自己需要決定。建議使用濃度在1￡-4毫摩爾。注：使用前完全溶解氯化鎂溶液并充分振蕩幾秒鐘。 |
3．10X反應(yīng)緩沖液(含MgCl2)：包含 15mM MgCl2，500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH9.0, 25℃), 1% Triton X-100. 建議該緩沖液加入每種dNTP的適濃度為0.2毫摩爾。 |
注意：反復(fù)凍融可能會(huì)引起氯化鎂沉淀，將緩沖液在90℃加熱10分鐘能恢復(fù)溶液的均一性。 |
質(zhì)量控制： |
1. 活性:大于5單位/微升。 |
2. Overdigest (OD) 檢測: 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克λDNA在74℃下反應(yīng)16小時(shí)后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢出降解的λDNA。 |
3. 切口酶檢測: 30單位Taq DNA 聚合酶與1微克超螺旋質(zhì)粒DNA在74℃下反應(yīng)4小時(shí)后，用瓊脂糖凝膠電泳未檢出切口酶或線性DNA帶。 |
4. 熱穩(wěn)定性檢測: 94℃時(shí)，每微升5單位Taq DNA 聚合酶在緩沖液中的半衰期長于1小時(shí)。 |
