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| 產(chǎn)地 | 中國 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | P1120 |
| 用途 | Proteinase K，中文名為蛋白酶K。進(jìn)口產(chǎn)品配置，不含DNas，不含RNase，可直接使用?？梢杂糜谙鞣N蛋白。用于各種常見的分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)實驗 |
| 包裝規(guī)格 | 1ml |
| 純度 | 10mg/ml% |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
蛋白酶K溶液
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蛋白酶K的主要作用：蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會，提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導(dǎo)致組織切片的脫落，細(xì)胞核 的消失，從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現(xiàn)的問題，并能達(dá)到理想的染色效果。
蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)：20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)(proteinase K)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。蛋白酶K不被金屬離子、螯合劑(e.g. EDTA)、巰基試劑或胰蛋白酶/麋蛋白酶蛋白抑制劑失活。蛋白酶K也是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。
推薦反應(yīng)緩沖液：
50mM?Tris-HCl (pH7.5),10mMCaCl2。
值得注意的是，蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA
蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會，提高雜交信號。?但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導(dǎo)致組織切片的脫落,細(xì)胞核的消失，從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現(xiàn)的問題，并能達(dá)到理想的染色效果。
保存：
保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融，有效保證12月
使用：
孵育溫度為55至65℃，蛋白酶K?在65oC?的活性比?25oC的活性高12倍。在溫度65?oC?之上迅速變性。在95oC?加熱10分鐘、使用PMSF等蛋白酶抑制劑或用苯酚/氯仿抽提均可失活。理想孵育溫度為58℃，孵育時間為15分鐘至48小時；理想孵育時間為2小時。
蛋白酶K，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。蛋白酶K的應(yīng)用比較廣泛。包括制備脈沖電泳的染色體 DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性。
蛋白酶K的主要作用：蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會，提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導(dǎo)致組織切片的脫落，細(xì)胞核 的消失，從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現(xiàn)的問題，并能達(dá)到理想的染色效果。
蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)：20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)(proteinase K)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。
蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融，有效保證12月。
蛋白酶k的使用方法：孵育溫度為55至65℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時。
在0.2-1%SDS或約10mM尿素存在的情況下，蛋白酶K顯示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作濃度為0.05-1mg/ml，根據(jù)所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH是否適合、溫度是否適合等因素確定具體的工作濃度。 常用濃度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、鹽酸胍對蛋白酶K的活力影響不大。
注意事項：
如果每次的使用量很小，可以適當(dāng)分裝后再使用。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
保存要求：-20℃保存，有效期一年。
產(chǎn)品類目：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)試劑 ,2. 細(xì)胞培養(yǎng)耗材 ,3. 蛋白質(zhì)提取 ,4. 蛋白質(zhì)純化 ,5. 蛋白質(zhì)定量 ,6. 蛋白質(zhì)電泳 ,7. 蛋白質(zhì) Marker,8.Western blot,9. 免疫組化 ,10. 抗體 ,11.SABC 試劑盒 ,12. 基因組和質(zhì)粒提取試劑盒 ,13. 核酸提取相關(guān)試劑 ,14.DNA 電泳 ,15.DNA Marker,16.RNA 相關(guān)試劑 , 17.PCR,18.Southern blot,19. 基因工程 ,20. 生物培養(yǎng) ,21. 堿基與核酸 ,22. 氨基酸 ,23. 多肽及蛋白質(zhì) ,24. 酶 ,25. 輔酶 ,26. 酶抑制劑 ,27. 維生素 ,28. 抗生素 ,29. 染色劑 ,30. 糖與碳水化合物 ,31. 生物緩沖液 ,32. 植物生長激素 ,33. 酸和鹽分離效 ,34. 胺 ,35. 層析介質(zhì) ,36. 常用生化試劑 ,37. 其他生化試劑 ,38. 耗材 ,39. 標(biāo)準(zhǔn)品 ,40. 新增產(chǎn)品
參考文獻(xiàn)：
《Liraglutide reduces hepatic glucolipotoxicity?induced liver cell apoptosis through NRF2 signaling in Zucker diabetic fatty rats》 作者:Jun Guo，Cai Li，Chunxiao Yang，Bing Li，Jie Wei，Yajun Lin，Peng Ye，Gang Hu，Jian Li 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:29693190
