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產(chǎn)地 | 中國(guó) |
品牌 | solarbio |
貨號(hào) | E1171 |
英文名稱(chēng) | EDTA decalcifying solution, pH 7.2 |
包裝規(guī)格 | 100ml/500ml |
純度 | 現(xiàn)詢(xún)客服% |
CAS編號(hào) | |
別名 | 現(xiàn)詢(xún)客服 |
分子式 | 現(xiàn)詢(xún)客服 |
EDTA脫鈣液(pH 7.2)
貨號(hào):E1171
規(guī)格:100ml/500ml
保存:常溫保存,有效期1年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時(shí),含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因?yàn)殁}和石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對(duì)含鈣組織好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者同時(shí)進(jìn)行。然后進(jìn)行下游的實(shí)驗(yàn),如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機(jī)酸、無(wú)機(jī)酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。
EDTA 是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響小,可以較好的保存組織的某些酶類(lèi),經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。
Solarbio EDTA 脫鈣液優(yōu)點(diǎn):①經(jīng)EDTA 脫鈣的組織染色結(jié)果好;②對(duì)組織的結(jié)構(gòu)損害小;③用化學(xué)方法
測(cè)試可以確定脫鈣的終點(diǎn)。
Solarbio EDTA 脫鈣液缺點(diǎn):①脫鈣速度很慢,不適合常規(guī)標(biāo)本脫鈣使用;②脫鈣后組織會(huì)稍微變硬。
操作步驟:
1,骨組織脫鈣時(shí),取材不易過(guò)厚,一般大約5mm。
2,組織固定后,用PBS 清洗3 次,每次20min。
3,組織用蒸餾水洗清洗3 次,每次20min。
4,組織轉(zhuǎn)移至20~30 倍體積的EDTA 脫鈣液中,脫鈣10~30 天或更長(zhǎng)時(shí)間。如果想加快脫鈣速度,可以置于37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要,更換新的EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組織脫鈣2 周~3 個(gè)月即可,每周更換一次,直至終點(diǎn)。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在200W左右的檔位,每次加熱5min,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù)3~5min,中間間隔3~5min。
5,用蒸餾水沖洗數(shù)次。
6,常規(guī)脫水、包埋。
注意事項(xiàng):
1,厚度5mm 的骨組織塊脫鈣時(shí)間一般脫鈣10~30 天即可。
2,適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過(guò)37~40℃,溫度過(guò)高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于60℃。
3,脫鈣應(yīng)徹底,防止脫鈣不足或過(guò)度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時(shí)盡量縮短脫鈣時(shí)間,以免脫鈣過(guò)長(zhǎng)引起組織損害。
4,脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5,骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時(shí)進(jìn)行,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。
6,每隔一段時(shí)間檢測(cè)一次脫鈣程度,避免脫鈣過(guò)度,脫鈣過(guò)度會(huì)增加組織的損傷程度,影響染色結(jié)果。
7,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。