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產(chǎn)地 | 美國(guó) |
品牌 | solarbio |
英文名稱 | 透析袋 擱寬45 截留分子量2000 |
包裝規(guī)格 | 0.5米 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
別名 | 透析袋 擱寬45 截留分子量2000 |
分子式 |
透析袋使用說明
透析即用半透膜 ( 透析袋 ) 將大分子蛋白質(zhì)分離出來。在生物大分子制備過程中除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品,透析法簡(jiǎn)便。透析時(shí),小于 MWCO 的分子在透析膜二邊溶液濃度差產(chǎn)生的擴(kuò)散壓作用下透過滲透析膜、其速度與濃度梯度、膜面積及溫度成正比。欲快速透析可采用直徑較小的,透析袋以增加膜面只。常用溫度 4 "C ,升溫、更換袋外透析液或用磁力攪拌器,均能提高透析速度。
使用須知
1 . 某些化學(xué)物質(zhì)會(huì)破壞透析袋微孔且不可逆轉(zhuǎn)。計(jì)有 :
鹵化 烴 、醇、 酮 、 酯, 酸 ( 甲酸、 乙 酸、稀強(qiáng)酸如 5%HCL ) , 10% 萘酚 , 30% 雙氧水。
甲醇、 乙醇 : 濃度小于 5% 時(shí),透析袋功能在,而 MWCO 變化。
2 蛋自質(zhì) 吸附 量, 小于 1 ug / 克 ( 以透析袋干重計(jì) ) 。正常使用 PH 值 5-9 C 可重復(fù)使用 ) 。
極限使用 PH 值 2-12 C 一次性使用 ) 。
3. 前處理 : 煮沸 5 分鐘后用蒸飽水 60 ℃ 沖洗 2 分鐘,置于 4 ℃ 蒸錨水中待用。長(zhǎng)期保存液 0.05%-0.1% 疊氮鈉 , 1mMEDTA 或 50% 甘油,溫度 4 ℃ , 使用前以 蒸餾水 洗凈。
4 即用型透析袋無須前處理,使用前用 蒸餾水洗凈即可。
5 透析袋裝液時(shí)應(yīng)留 1/3-1/2 空間, 以防透析過程中,袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋 脹破,含 鹽量高的蛋白質(zhì)溶液透析過夜時(shí),體積增加 50% 系正常情況 ) 。
6 使用時(shí)需帶手套。
7 透析效果檢查用
1% 氯化領(lǐng)檢查硫酸按、硫酸 鈉
1% 硝酸銀檢查氯化 鈉、氯化鉀
透析袋的處理
分子在半透膜間的分離是由膜兩側(cè)溶液的濃度差驅(qū)動(dòng)的,受相對(duì)于膜內(nèi)微孔尺寸的分子大小 ( 分子質(zhì)量 ) 的限制。微孔尺寸決定著截留分子質(zhì)量,截留分子質(zhì)量的定義是當(dāng) 90% 的溶質(zhì)分子可被膜截留時(shí)的分子質(zhì)量。實(shí)際某一溶質(zhì)的通透性不僅取決于分子的大小,還取決于分子的形狀、分子的水化程度及其所帶的電荷。這些參數(shù)均受溶劑的性質(zhì)、 pH 以及離子強(qiáng)度的影響。因此截留分子質(zhì)量只能作為參考,而不能*地用來預(yù)測(cè)在各種溶質(zhì)和溶劑下的透析行為。透析膜孔徑范圍很大 ( 從 100Da 到 2000kDa ). 在透析大多數(shù)質(zhì)粒 D NA 和許多蛋白質(zhì)時(shí),截留分子質(zhì)量在 12000-14 000Da 之間比較適合。
(1) 將透析管剪成適當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度 ( 10 - '20cm) 的小段,即形成透析袋。
( 2 ) 在大體積的 2% (m/ V) 碳酸氫 鈉 和 lmmol / L EDTA (pH8. 0 ) 中將透析袋煮沸 10min 。
(3) 將透析袋用 蒸餾水 徹底漂洗。
(4) 將透析袋置 lmmol / L EDTA ( pH8 . 0 ) 中煮沸 10min.
( 5 ) 待透析袋冷卻, 存放于 4 ℃ ,應(yīng)確保透析袋始終浸沒在液體中。
( 重要 : 從此步起用透析袋時(shí)一定要戴手套操作。 )
( 6 ) 在使用之前要用 蒸餾水 將透析袋里外加以清洗。
【 注 】
也可將透析袋放在廣口瓶中充滿水, 松動(dòng)瓶蓋, 于 2 0p s i ( l .40kg / c m 2 ) 高壓滅菌 10 m i n ,代替第 4 步用 lmmol / L EDTA ( pH8 . 0 ) 中煮沸 10mi 日的操作。
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