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| 產(chǎn)地 | 中國 |
| 品牌 | solarbio |
| 貨號 | G1280 |
| 用途 | 主要用來檢測組織中的糖原或其他多糖物質(zhì) |
| 英文名稱 | PAS staining fluid |
| 包裝規(guī)格 | 100ml×2 |
| 純度 | 100ml×2% |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進口 | 否 |
產(chǎn)品簡介
1.中文名：糖原PAS染色液（過碘酸-雪夫染色液）
2.英文名：PAS staining fluid
3.分 類：生化試劑
4.保存條件：RT
5.品 牌：solarbio
PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain）在組織學(xué)上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。
本實驗介紹了過碘酸-雪夫（PAS）染色的原理及操作步驟。
PAS染色實驗原理
胞漿內(nèi)存在糖原或多糖類物質(zhì)（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）經(jīng)過碘酸（periodicacid）氧化，轉(zhuǎn)變?yōu)槎┗–HO-CHO），與雪夫(Schiff)試劑中的無色品紅結(jié)合，形成紫紅色染料而沉積于細胞內(nèi)多糖所在處。該反應(yīng)稱為過碘酸-雪夫 (PAS)陽性反應(yīng)，以前也稱為糖原染色。
主要試劑
1. 高碘酸氧化液：
HIO4·2H2O1g,蒸餾水加至100ml。此液溶解后保存于冰箱中待用。
2. Schiff試劑：
將1g堿性品紅溶于200ml煮沸的蒸餾水中。搖蕩5分鐘，冷卻至60度左右，過濾，并向濾液中入1mol/LHCl20ml，混勻。冷至 250C時，加2g偏重亞硫酸鈉（或鉀）（Na2S2O5）。將此液置帶塞的棕色玻璃瓶中，放暗處24小時。加1g活性碳，搖動1分鐘，濾紙過濾。保存于冰箱中。
3. 亞硫酸液
100g/L偏重亞硫酸鈉6ml；1mol/L鹽酸5ml；蒸餾水100ml；每次用前新鮮配置。
4. 20g/L甲綠
甲綠2g；蒸餾水加至100ml
5. 淀粉酶嚼石蠟刺激分泌唾液離心取上清液，內(nèi)含淀粉酶，將麥芽糖淀粉酶0.1~1.0g溶于0.02mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.0）100ml中。
PAS染色步驟
1. 固定新鮮干燥的涂片用品5%乙醇固定10min，蒸餾水沖洗，待干；
2. 如涂片需要消化，可加唾液或麥芽糖淀酶，置室溫消化60min，然后用蒸餾水沖洗；
3. 10g/L高碘酸氧化15～20min,蒸餾水沖洗，待干；
4. 置雪夫染液中室溫染色30～60min；
5. 用亞硫酸溶液沖洗3次后，再用自來水沖洗2～3min，待干；
6. 20g/L甲綠復(fù)染10～20min；
7. 水洗，待干，鏡檢。
8. 實驗結(jié)果計算
1) 中性粒細胞糖原含量參考標(biāo)準(zhǔn)：
?。?）胞質(zhì)無顆粒
?。?）胞質(zhì)呈淡紅色，無顆粒
?。?）胞質(zhì)呈紅色，有少量顆粒
?。?）胞質(zhì)呈暗紅色，顆粒較密
?。?）胞質(zhì)呈紫紅色，顆粒極密
2) 淋巴細胞系：
大多數(shù)淋巴細胞呈陰性反應(yīng)，少數(shù)為（ ）的陽性反應(yīng)。
淋巴細胞糖原含量程度參考標(biāo)準(zhǔn)
（-）胞質(zhì)內(nèi)無顆粒
?。?）胞質(zhì)內(nèi)有顆粒
?。?）有較粗紅色顆粒
（ ）有粗大紅色顆粒
?。?）顆粒粗大并有紅色塊狀
3) 紅細胞系：
幼紅細胞和紅細胞呈陰性反應(yīng)
紅細胞系列糖原含量程度參考標(biāo)準(zhǔn)
?。?）胞質(zhì)無顆粒
?。?）有少數(shù)紅色顆粒
?。?）有較粗紅色顆?；驈浡t色
?。?）有粗大紅色顆?；蛏罴t色
?。?）有粗大紅色塊狀或紫紅色
4) 巨核細胞：
巨核細胞和血小板染色反應(yīng)均為陽性
巨核細胞糖原含量程度參考標(biāo)準(zhǔn)
?。?）胞質(zhì)無顆粒
?。?）少量糖原包涵體
?。?）中等量糖原包涵體，定位于核膜出或分散胞質(zhì)中，占胞質(zhì)1/3
?。?）大量糖原包涵體分散于胞質(zhì)的1/2
?。?）糖原包涵體充滿整個胞質(zhì)
5) 單核細胞呈陰性或陽性，顆粒細小，往往位于胞質(zhì)邊緣：
漿細胞大多呈陰性，少數(shù)為紅色顆粒陽性；
組織細胞為陰性反應(yīng)；
巨噬細胞可呈陽性，為紅色顆粒反應(yīng)。
注意事項
1. 所用染色缸及器具應(yīng)十分清潔、干燥；
2. 固定試劑不同，染色效果不同。目前較常用的有95%乙醇、純甲醇及甲醛蒸氣，其中乙醇固定后糖原顆粒明顯，各成熟粒細胞的反應(yīng)有較明顯的顏色差異，易于判斷陽性反應(yīng)的程度，且唾液消化后的對照標(biāo)本沒有假陽性，故通常選用乙醇為固定劑；
3. 10g/L高碘酸溶液質(zhì)量要保證，變黃則不能用，氧化時間要準(zhǔn)確，否則將導(dǎo)致假陽性或假陰性；
4. 堿性品紅試劑對染色的影響不同品牌的堿性品紅染色效果不一，堿性品紅的質(zhì)量是試驗成敗的關(guān)鍵因素之一。希夫(Schiff)染液應(yīng)避光保存，無色，變紅則失效；
5. 染色后標(biāo)本應(yīng)及早觀察和記錄，染色后標(biāo)本保存8天后，將逐漸褪色，保存時間延長，褪色更為明顯。
相關(guān)文獻：
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《Stem cells from human exfoliated deciduous teeth ameliorate type II diabetic mellitus in Goto-Kakizaki rats》 作者:Nanquan Rao, Xiaotong Wang, Yue Zhai, Jingzhi Li, Jing Xie, Yuming Zhao and Lihong Ge 期刊:Diabetology & Metabolic Syndrome 影響因子:2.361 PMID:30858895
《Effects of cholecalciferol cholesterol emulsion on renal fibrosis and aquaporin 2 and 4 in mice with unilateral ureteral obstruction》 作者:N Liu, Y Zhang, H Su, J Wang, Z Liu, J Kong 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.457 PMID:29602131
《Salmonella Outer Protein B Suppresses Colitis Development via Protecting Cell From Necroptosis》 作者:Gui-Qiu Hu, Yong-Jun Yang, Xiao-Xia Qin, Shuai Qi, Jie Zhang, Shui-Xing Yu, Chong-Tao Du, and Wei Chen 期刊:Frontiers in Cellular and Infection Microbiology 影響因子:3.518 PMID:31024858
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